Ateneo - UPO

Il corso fornirà le basi delle tecniche analitiche strumentali più utilizzate nel laboratorio clinico (cromatografia liquida gascromatografia, tecniche elettroforetiche, analisi elementare etc.), insieme ai metodi di pretrattamento e analisi del campione più utilizzati nel laboratorio clinico. Saranno affrontati inoltre gli indici di performance di un metodo analitico (LOD, LOQ, recupero, range dinamico e lineare, robustezza, incertezza di misura, esattezza, ripetibilità, etc.). Infine, saranno presentati i principi e le applicazioni di metodi chemiometrici di identificazione di biomarcatori.

Dispense fornite dal docente

Il corso ha l'obiettivo di fornire allo studente conoscenze della più diffusa strumentazione analitica (cromatografia liquida, gascromatografia, tecniche elettroforetiche, analisi elementare) e sui parametri per valutare la performance di un metodo analitico. Sono inoltre fornite conoscenze circa i metodi di pretrattamento del campione per il laboratorio clinico e i fondamenti dei metodi analitici utilizzati per la determinazione di parametri ematici ed urinari.
Infine, saranno fornite conoscenze dei metodi analitici multivariati per l’identificazione di biomarcatori di patologia.
Lo studente acquisirà capacità di senso critico, affinando l’abilità di scegliere la miglior strategia sperimentale per risolvere un dato problema analitico.
Saranno anche stimolate le capacità di comunicazione tramite un lessico appropriato.

Nessuno

Lezioni frontali, discussioni in aula con gli studenti

L'apprendimento in itinere sarà valutato mediante discussioni in aula con gli studenti.

Esame orale consistente in tre domande aperte: una sugli aspetti teorico-pratici delle tecniche analitiche viste a lezione; una sulla determinazione di parametri analitici in campioni biologici; una sui metodi di identificazione di biomarcatori.

Parte I – Tecniche strumentali di analisi.
Introduzione alle tecniche spettroscopiche, la radiazione elettromagnetica, assorbimento, emissione, fluorescenza, fosforescenza.
Assorbimento UV-visibile molecolare: principio, strumentazione, applicazioni.
Tecniche elementari: introduzione, assorbimento atomico a fiamma e a fornetto, strumentazione, interferenze, metodi di correzione, applicazioni; plasma ad accoppiamento induttivo, strumentazione, applicazioni.
Tecniche cromatografiche: introduzione, teoria dei piatti e delle velocità, cromatografia liquida (meccanismi, strumentazione, applicazioni), gascromatografia (meccanismi, strumentazione, applicazioni).
Tecniche elettroforetiche: elettroforesi capillare, tecniche di immunoprecipitazione elettroforetiche e non, tecniche in gel, applicazioni.
Indici di performance di un metodo analitico (LOD, LOQ, recupero, range dinamico e lineare, robustezza, incertezza di misura, esattezza, ripetibilità, etc.).
Parte II – Analisi di campioni biologici.
Metodi di prelievo e conservazione del campione. Determinazioni analitiche nel laboratorio chimico-clinico: bilancio elettrolitico, oligoelementi, calcio, magnesio e cationi maggiori, lipidi e lipoproteine, metabolismo delle proteine, bilirubina e molecole relazionate all’ittero, metabolismo dei carboidrati, bilancio del rimodellamento osseo, enzimi, marcatori circolanti, ormoni, esami delle urine.
Parte III – Biomarcatori.
Introduzione ai metodi multivariati. Metodi monovariati: test T-student. Metodi multivariati: correlazione, pre-trattamento del dato, analisi delle componenti principali, metodi di classificazione, il problema dell’identificazione di biomarcatori, matrice di confusione, sensibilità, specificità, precisione, accuratezza, non-error-rate%, curva ROC.

Conoscenza e comprensione
- conoscenza delle basi teoriche e teorico/pratiche delle più moderne tecniche di analisi (cromatografia, metodi elementari, spettroscopia UV-visibile, tecniche elettroforetiche, cenni di spettrometria di massa)
- conoscenza dei metodi di pretrattamento e analisi di campioni biologici
- conoscenza dei principi dell’analisi multivariata e dei principali metodi di pattern recognition e classificazione

Capacità di applicare conoscenza e comprensione
- saper confrontare diverse tecniche analitiche
- saper scegliere il metodo migliore per la determinazione di parametri analitici in campioni biologici
- saper commentare una curva ROC e confrontare metodi di screening e metodi di conferma

Abilità comunicative
- acquisire e saper utilizzare un lessico appropriato in relazione agli argomenti affrontati nel corso

Autonomia di giudizio
- capacità di scegliere tra diverse tecniche analitiche per uno stesso scopo