Ateneo - UPO

Il corso illustra le principali tecniche di analisi del DNA applicate alla genetica umana. Vengono illustrati i principi alla base delle tecniche di analisi del DNA e di come questi vengano applicati per analizzare il DNA genomico umano.
Utilizzo dei principali software di analisi genomica e per la lettura delle sequenze.

nessuno testo , solo le diapositive fornite dal docente

Comprendere le principali tecniche di analisi del DNA applicate alla genetica umana

Conoscenza base della genetica umana

lezioni frontali a cui segue esperienza in laboratorio per la messa in pratica delle tecniche apprese.
Segue lezione sui principali software di analisi genomica mediante utilizzo dell'aula informatica applicando l'analisi dei risultati ottenuti in laboratorio .

esame scritto con quiz a risposta multipla

Principi su cui si basano le tecniche di analisi del DNA .
Ibridazione tra acidi nucleici
Concetto di stringenza e fattori che la modificano
temperatura di melting e fattori che influiscono sulla Tm
Assorbanza legge di lambert beer
tecniche di estrazione di acidi nucleici
analisi quantitativa e qualitativa del DNA estratto
elettroforesi su gel d'agarosio
Enzimi di restrizione e frequenza di taglio
Reazione a catena della polimerasi, principio
Disegno degli oligonucleotidi e criteri da utilizzare
Utilizzo del programma bioinformatico BLAst per analisi specificità oligonucleotidi
Controlli interni PCR: controllo negativo, controllo positivo
Elettroforesi su gel d'agarosio e elettroforesi capillare per analisi dell'amplificato
Analisi elettroforeretica di amplificati contenenti sequenze ripetute o dopo taglio con enzimi di restrizione .
purificazione dei prodotti di amplificazione: tecniche
sequenziamento Sanger, principio
procedura sequenziamento Sanger e analisi degli elettroferogrammi dopo elettroforesi capillare
esempi di analisi di elettroferogrammi

Comprensione delle principali tecniche di analisi del DNA e del loro campo di applicazione nella genetica umana .
conoscenza dei limiti e vantaggi delle tecniche illustrate.