Ateneo - UPO

Il corso si prefigge di formare lo studente affinchè possa acquisire conoscenze generali, anche di tipo metodologico, in Biochimica Clinica. Nel corso vengono affrontate le alterazioni a carico dei principali organi e tessuti, indagabili mediante l'analisi dei fluidi biologici, approfondendo le conoscenze anche in merito alla prevenzione ed al monitoraggio delle patologie.

Titolo: Medicina di Laboratorio; Autori: I. Antonozzi e E. Gulletta; Casa Editrice: Piccin
Titolo: Medicina di Laboratorio; Autore: G.Federici; Casa Editrice: Mc Graw Hill
Slides.

Fornire le conoscenze necessarie per un corretto uso degli strumenti analitici e per l' applicazione di tecniche analitiche sia tradizionali che avanzate nel settore della Biochimica Clinica ed Enzimologia Clinica.

Conoscenze approfondite in Chimica organica e Biochimica.

Lezioni frontali.

Esame orale: verranno somministrate 5 domande riferite alle principali macro-aree affrontate durante il corso di studio,più una domanda facoltativa sulla citometria a flusso.

LEZIONE 1
Introduzione al corso.
Modalità di svolgimento dell'esame.
Di cosa si occupa la biochimica clinica
Ruolo del laboratorio
La richiesta di un esame
Preparazione del paziente
Modalità di prelievo/raccolta dei principali liquidi biologici (urine, liquor, liquidi peritoneale-pleurico- pericardico, liquido amniotico, liquido sinoviale, succo gastrico, liquido seminale, sangue venoso- arterioso- capillare)
Anticoagulanti, attivatori e conservanti, trasporto e conservazione dei campioni, fattori interferenti le analisi biochimiche
Variabilità pre-analitica

LEZIONE 2
Variabilità pre-analitica: trasporto, accettazione, centrifugazione, conservazione dei campioni biologici
Variabilità analitica: precisione, accuratezza, sensibilità analitica, specificità analitica.
Controllo di qualità: controllo intra-laboratorio, VEQ, carte di controllo.
Valori di riferimento.
Sensibilità diagnostica e specificità diagnostica.
Curve ROC.
Metodi spettrofotometrici.

LEZIONE 3
Principali metodi analitici
Colorimetri, fotometri e spettrofotometri.
Legge di Lambert-Beer.
Curve di taratura.
Metodiche spettrofotometriche end-point, cinetiche , cinetiche fixed-time.
Elettroforesi in fase solida ed elettroforesi capillare, immunofissazione.
Sistema immunitario e metodiche immunologiche: senza marcatura (precipitazione, agglutinazione diretta ed indiretta), con marcatura (RIA, EIA, ELISA).

LEZIONE 4
Esame emocromocitometrico
Esame completo delle urine: esame fisico, chimico, del sedimento urinario al microscopio ottico
Metabolismo glucidico. Caratteristiche biochimiche dei carboidrati.
Il ruolo epatico
Omeostasi glicemica: Insulina, glucagone, GH, somatostatina, adrenalina, cortisolo.

LEZIONE 5
Metabolismo glucidico: il diabete T1D, T2D, IGT, diabete gravidico, endocrinopatie causa di iperglicemia.
Criteri per fare diagnosi di diabete. Esami di base, di approfondimento e monotoraggio terapia: glicemia, OGTT, profilo glicemico, insulinemia, ricerca Ab anti insula pancreatica, Ab anti insulina, HbA1c, Fruttosamina.
Metabolismo proteico: aminoacidi, proteine. Funzione delle proteine. Principali proteine di interesse diagnostico identificabili mediante analisi elettroforetica: pre-albumina, albumina, alfa1-antitripsina, alfafetoproteina, alfa2-aptoglobina, alfa2-macroglobulina, transferrina, immunoglobuline.
Componenti monoclonali: MGUS e MM.
Analisi di tracciati elettroforetici normali e patologici.
Dosaggio PT (metodo Biureto), dosaggio Albumina (metodo Bromocresolo).

LEZIONE 6
Funzionalità epatica: cenni di anatomia e fisiologia.
Produzione, ruolo e dosaggio della bilirubina totale, diretta o coniugata e indiretta o non coniugata.
Classificazione degli itteri. Principali enzimi di produzione epatica.
Gli enzimi in generale: classificazione (EC), teoria di Michaelis-Menten, sito attivo, cofattori e inibitori, dosaggio (cinetica enzimatica).
Gli isoenzimi. Principali enzimi di interesse diagnostico: LDH e suoi isosenzimi, ALP e suoi isoenzimi, GOT, GPT, GGT, CK e suoi isoenzimi, Amilasi totale ed isoenzima pancreatico, Lipasi, Colinesterasi, N. di dibucaina.

LEZIONE 7
Metabolismo del ferro: assorbimento intestinale, omeostasi del ferro.
Caratteristiche generali di ferritina, emosiderina, transferrina, lattoferrina. Anemia sideropenica. Malattia da accumulo di ferro.
Quadro marziale: dosaggio della sideremia, della transferrina, della ferritina, TIBC.
Marcatori tumorali: genesi tumorale, classificazione dei markers tumorali, metodi di dosaggio. Sensibilità e specificità diagnostica, VPP, VPN.
Utilizzo clinico dei marcatori tumorali: quando dosarli (screening, follow-up).
Linee guida per la richiesta dei marcatori tumorali. Criteri di specificità tissutale.
PSA, Ca15.3, MCA, TPA, Cyfra 21.2, NSE

LEZIONE 8
Marcatori tumorali: CEA, Tg, Calcitonina, CA125, CA19.9, AFP, altri indicatori di progressione neoplastica (B-HCG, idrossiprolina urinaria, ferritina, beta-2- microglobulina).
Alterazioni del metabolismo lipidico.
I lipidi: acidi grassi, trigliceridi, fosfolipidi, steroli (colesterolo, colecalciferolo, ormoni steroidei).
Le lipotroteine: chilomicroni, IDL, VLDL, LDL, HDL.
Metodi di determinazione dei complessi lipoproteici (ultracentrifugazione, elettroforesi). Via esogena ed endogena del metabolismo lipidico. Endocitosi delle LDL mediata da recettori. I recettori Scavenger: patogenesi dell'aterosclerosi. HDL: il trasporto inverso del colesterolo.
Le apoliproteine.
Linee guida per la refertazione dei livelli plasmatici di lipidi e lipoproteine. Dislipidemie.

LEZIONE 9
Marcatori di danno miocardico.
Diagnosi differenziale dei dolori toracici severi o prolungati, definizione di cardiopatia ischemica, fattori di rischio coronarico, patogenesi dell'aterosclerosi, IMA, angina instabile. Concetto di golden hour e di ritardo evitabile.
Il marcatore biochimico ideale. CPK totale, CK-MB attività catalitica e di massa, Mioglobina, Troponine I e T, hs-Troponina.
Scompenso cardiaco: peptidi natriuretici. ANP, BNP, CNP, DNP, Urodilatina. Sintesi di BNP (pre-proBNP, proBNP, NT-proBNP). Dosaggio e scelta.
Funzionalità renale: il nefrone. Produzione delle urine. Filtrazione, riassorbimento, secrezione. Insufficienza renale acuta e cronica.
Il laboratorio nella valutazione dell'insufficienza renale: urea (BUN) e azoto ureico, creatinina, acido urico.
Concetto di velocità di filtrazione glomerulare e clearance.

LEZIONE 10
Adattamento dei mammiferi alla vita terrestre: meccanismi di mantenimento dell'omeostasi idrica ed equilibrio acido-base.
Regolazione dell'equilibrio acido-base: il ruolo dell'ormone adiuretico (ADH) .
Gli elettroliti. Il sodio: ruolo, regolazione, metodi analitici. Aldosterone. Il potassio: ruolo, regolazione, metodi analitici. Il cloro.
La citometria a flusso: breve storia. I fluorocromi. Gli anticorpi monoclonali. Campi di applicazione della citometria a flusso. Materiali analizzabili. Criteri per un'ottimale analisi citometrica. Metodi di marcatura di antigeni di superficie e di antigeni intracitoplasmatici e nucleari.
Analisi collegiale di referti di laboratorio.

Lo studente dovrà:
- saper applicare le tecniche analitiche tradizionali ed avanzate ed interpretare correttamente le informazioni ottenute dai dati del laboratorio clinico;
- aver acquisito le conoscenze generali e le metodologie diagnostiche di Biochimica Clinica ed Enzimologia Clinica