Ateneo - UPO

Introduzione generale della genomica applicata allo studio dei tumori.
Isolamento degli acidi nucleici. Elettroforesi del DNA. Clonaggio del DNA, vettore plasmidico, enzimi di restrizioni.
Reazione a catena della polimerasi (PCR), e sue applicazioni. Southern blot, Northern blot
Elettroforesi delle proteine e western-blotting.
Tecnologia dei microarray e RNA sequencing.
Metodi di sequenziamento del DNA.
Next Generation Sequencing e sue applicazioni cliniche.
Immunoprecipitazione della cromatina (CHIP).
Citofluorimetria di flusso, principi generali e sue applicazioni (studi di apoptosi e ciclo cellulare).

Biologia molecolare. Principi e tecniche di Michael M. Cox et al Zanichelli
Pubblicazioni scientifiche

Fornire i principi generali su cui si basano le principali tecniche molecolari utilizzate nella diagnostica clinica e nella ricerca.

Conoscenze di base della biologia molecolare principalmente negli organismi eucarioti

Dispense, materiale didattico, presentazioni in PowerPoint delle lezioni ed articoli scientifici forniti dal docente

Prova scritta a domande a risposta multipla.

Introduzione generale della genomica applicata allo studio dei tumori.

Isolamento degli acidi nucleici (DNA e RNA), purificazione, e calcolo della concentrazione.

Elettroforesi del DNA. Clonaggio del DNA, vettore plasmidico, enzimi di restrizione. Trasformazione batterica.

Reazione a catena della polimerasi (PCR), PCR quantitativa.
Utilizzo di coloranti intercalati nel DNA capaci di emettere fluorescenza (SYBER-Green) o di sonde ad ibridazione legate a molecole fluorescenti per un approccio sequenza specifico (sonde
TaqMan). Applicazioni nella ricerca e nella cura.

Southern blot e Northern blot: principi generali e loro applicazioni
Elettroforesi delle proteine, western blotting.

Immunoprecipitazione della cromatina (CHIP)

Descrizione dei principi generali della tecnica di DNA microarray (utilizzo per studi di comparazione e di
raggruppamento). Applicazioni della genomica (medicina molecolare, medicina forense, farmacogenomica, studio di malattie multifattoriali). RNA sequencing (vantaggi rispetto ai microarray).

Metodi di sequenziamento del DNA (metodo Sanger).
Next-generation sequencing: principi generali e applicazioni cliniche delle tecniche di nextgeneration sequencing.

Farmacogenomica e terapia personalizzata

Citofluorimetria di flusso, principi generali (anticorpi monoclonali
legati a sostanze fluorescenti, analisi multi parametrica, sorting) e sue applicazioni (studi di apoptosi e ciclo cellulare).

Lo studente deve conoscere i principi generali di biologia molecolare e delle tecniche di biologia molecolare utilizzate nella ricerca e nella clinica